Kit HER2 pour l’orientation du traitement du cancer de sein

Le kit MAScIR HER2-Quant

L’orientation du traitement des patientes affectées par le cancer de sein par un médicament spécifique nécessite un test permettant la quantification de la protéine HER2 dans les tissus. Le kit MAScIR HER2-Quant est un test quantitatif in vitro d’amplification pour la détection et la quantification de l’ARNm codant pour la protéine HER2 dans les tissus de cancer de sein humain en utilisant la technologie de la RT-qPCR.

Ce kit, destiné à un usage diagnostic in vitro, constitue un outil pour le diagnostic moléculaire du cancer de sein permettant la quantification de la protéine HER2 pour l’orientation du traitement par la trastuzumab (Herceptine). Notre test permet la quantification d’une façon spécifique et précise de la protéine HER2 dans les échantillons de cancer de sein par la technique de la RT-qPCR.

En effet, 1.7 million nouveau cas par an est diagnostiqué chaque année au niveau mondial. Notre test a été validé à l’échelle nationale par les CHUs de Casablanca et de Rabat ainsi que par le CHU de Barcelone qui est un centre international de référence. Les validations ont démontré une concordance entre notre test et les tests utilisés en routine dans ces laboratoires.

Le kit MAScIR HER2-Quant est un test d’amplification in vitro basé sur la réaction en chaîne de la polymérase en temps réel (RT-qPCR) pour la détection qualitative et quantitative de l’ARNm codant pour la protéine HER2 dans des échantillons de biopsie de cancer de sein humain.

Pour effectuer la RT-qPCR (étape d’amplification), il faut préalablement procéder à l’étape d’extraction et purification des acides ribonucléiques (ARN) à partir des types d’échantillons de biopsies fraiche ou fixés et inclus dans la paraffine (FFPE). Les réactifs d’extraction ne sont pas fournis dans le présent kit.

Le kit MAScIR HER2-Quant ayant été conçu pour ne fonctionner que sur un éluât contenant l’ARN purifié du tissu de biopsie de cancer de sein, l’étape d’amplification s’effectue par RT-qPCR dans le même tube directement après rétro-transcription de cet ARN en ADNc.

Le kit MAScIR HER2-Quant comprend deux tests, un test en monoplex détectant l’ARNm codant pour la protéine HER2 et un autre en duplex qui cible les ARNm codant pour les protéines RPL37 et RPL30 humaines ayant le rôle de gènes de références.

L’éluât est ajouté à un mélange réactionnel pour la réalisation de la réaction RT-qPCR. Le mélange réactionnel contient une reverse transcriptase, une Taq Polymérase, un tampon, les désoxyribonucléotides triphosphates (dNTP) ainsi que les amorces et les sondes synthétiques spécifiques aux séquences ciblées. L’utilisation de deux paires amorces/sondes dans un seul mélange réactionnel (duplex) a l’avantage de détecter simultanément différentes cibles en une seule réaction.

Le kit MAScIR HER2-Quant utilise une quantification relative en se basant sur la méthode ΔΔCT.

Biopsies fraiche ou FFPE
Extraction des ARN
Amplification PCR
Analyse des données