Kit pour la quantification de la charge viral de l’hépatite C :

VIRQUANT RT-qPCR KIT- virus Hépatite C

Test moléculaire pour la détection, la quantification et le suivie du traitement du virus de l’hépatite C (VHC) par la technique de la RT-qPCR. En effet, 71 millions de la population mondiale est estimé d’être infectée par le virus de l’hépatite C (au Maroc 300 000 patients en totale). Chaque patient dont la contamination est confirmée devra recevoir un traitement antiviral avec une mesure de la charge virale au moins trois fois au cours du traitement.

Ce test a été validé cliniquement au sein de l’institut Pasteur Maroc (IPM) par le centre de référence dans l’analyse médicale des maladies infectieuses, et il a démontré une grande concordance avec les tests de référence utilisés en routine.

VIRQUANT RT-qPCR KIT- virus Hépatite C, MOLDIAG est un test in vitro d’amplification d’ARN, basé sur la technologie de la PCR en temps réel, permettant la détection et la quantification du VHC dans les prélèvements de sang humain (plasma). Le test est fabriqué de manière à permettre 20 réactions au maximum.

Le test comprend deux grandes étapes opérationnelles :

  • Une étape d’Extraction/Purification des acides nucléiques (réactifs non fournis dans ce kit) : l’ARN du VHC est extrait de l’échantillon puis purifié et concentré. Volume d’échantillon : 500 μL / Volume d’élution : 30 μL.
  • Une étape d’Amplification/Analyse : l’ARN du VHC est rétro transcrit en ADNc, puis amplifié par qPCR.

Chaque série de tests inclut une gamme de standards calibrés qui permet de construire une courbe standard (Ct vs Quantité de virus en IU/ml). La charge virale de chaque échantillon testé est obtenue en extrapolant de la droite de cette courbe standard la valeur correspondant à la valeur Ct de l’échantillon.

Le kit VIRQUANT RT-qPCR KIT- virus Hépatite C, MOLDIAG peut être utilisé avec différents automates et kits d’extraction d’acides nucléiques (ARN). A ce jour, les tests ont été optimisés à partir de 200-500μL d’échantillon avec les systèmes d’extraction suivants :

  • QIAamp® ARN Blood Mini kit (Qiagen);
  • Purelink Viral RNA/DNA Mini kit (Invitogen);
  • Arrow Viral NA Kit (Nordiag);
  • MagPurix 12A automate de purification d’acide nucléique (Zinexts) ;
  • QIAcube HT automate purification d’acidenucléique (Qiagen).

Le kit VIRQUANT RT-qPCR KIT – virus Hépatite C, MOLDIAG peut être utilisé avec différents systèmes ouverts d’amplification/analyses. A ce jour, les tests ont été optimisés avec les thermocycleurs PCR suivants :

  • LightCycler 480 II Real-Time PCR (Roche);
  • Applied biosystem 7500 fast (Life technologies) ;
  • Applied biosystem quant studio 6 flex (Life technologies) ;
  • Rotor-Gene Q 5plex Platform (QiaGen).
Échantillons du sang ou sérums humain
Extraction des ARN
Amplification PCR
Analyse des données